安全性評(píng)價(jià)研究體系
單次給藥毒性試驗(yàn)
重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)
安全藥理學(xué)試驗(yàn)
免疫原性試驗(yàn)
遺傳毒性試驗(yàn)
生殖毒性試驗(yàn)
致癌性試驗(yàn)
依賴性試驗(yàn)
局部毒性試驗(yàn)
毒代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)
◆ 單次給藥毒性試驗(yàn)
單次給藥毒性試驗(yàn)：動(dòng)物一次或24小時(shí)內(nèi)多次給予受試物后，一定時(shí)間內(nèi)所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，對(duì)初步闡明藥物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意義。
必要性：單次給藥毒性試驗(yàn)的結(jié)果可作為后續(xù)毒理研究劑量選擇的參考，也可提示些后續(xù)毒性研究需要重點(diǎn)觀察的指標(biāo)。此外，根據(jù)不同途徑給藥時(shí)動(dòng)物的反應(yīng)情況，初步判斷受試物的生物利用度，為劑型開(kāi)發(fā)提供參考。目前FDA、ICH和OECD均不要求必須進(jìn)行單次給藥毒性試驗(yàn)，但是國(guó)內(nèi)CDE還是要求開(kāi)展單次給藥毒性試驗(yàn)。
◆ 重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)
預(yù)測(cè)受試物可能引起的臨床不良反應(yīng)，包括不良反應(yīng)的性質(zhì)、程度、量效和時(shí)效關(guān)系、以及可逆性等；
判斷受試物重復(fù)給藥的毒性靶器官或靶組織；
如果可能，確定未觀察到臨床不良反應(yīng)的劑量水平（No Observed Adverse Effect Level, NOAEL）；
推測(cè)第一次臨床試驗(yàn)（First in Human, FIH）的起始劑量，為后續(xù)臨床試驗(yàn)提供安全劑量范圍；;
為臨床不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)及防治提供參考。
● 一般毒性相關(guān)的指導(dǎo)原則
藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則
藥物重復(fù)給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則
ICH M3(R2)：支持藥物進(jìn)行臨床試驗(yàn)和上市的非臨床安全性研究指導(dǎo)原則
ICH S4：動(dòng)物慢性毒性試驗(yàn)的期限（嚙齒類和非嚙齒類）
ICH S6(R1) ：生物制品的臨床前安全性評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則
ICH S11：支持兒科用藥開(kāi)發(fā)的非臨床安全性評(píng)價(jià)
ICH S9：抗腫瘤藥物非臨床評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則
● 服務(wù)內(nèi)容：
檢查標(biāo)準(zhǔn)：
一般情況(體重、進(jìn)食量、活動(dòng)情況)、死亡率、毒代、器官重量、病理、臨床生化、血象、尿常規(guī)、血凝、毒代動(dòng)力學(xué)檢測(cè)等。除必需的根據(jù)受試物的特點(diǎn)，針對(duì)性地增加相應(yīng)的檢測(cè)。特殊靶毒性增加特殊檢測(cè)項(xiàng)目。
● 動(dòng)物種屬
嚙齒類動(dòng)物（大鼠、小鼠、倉(cāng)鼠、豚鼠）
非嚙齒類動(dòng)物（兔、犬、非人靈長(zhǎng)類、小型豬等）
● 常規(guī)給藥途徑
表1：常規(guī)給藥途徑與給藥量（以及最大給藥量）
a 對(duì)于非水性注射劑，再次給藥前必須考慮吸收時(shí)間。每天不得超過(guò)兩個(gè)肌內(nèi)部位。皮下部位每天應(yīng)限于兩個(gè)或三個(gè)部位。皮下部位不包括弗式佐劑給藥。
b 每個(gè)部位的總注射量單位是毫升。
c 沒(méi)有數(shù)據(jù)。
● 特殊給藥途徑
◆ 安全藥理學(xué)試驗(yàn)
心血管系統(tǒng)
中樞神經(jīng)系統(tǒng)
呼吸系統(tǒng)
胃腸道消化系統(tǒng)
泌尿/腎臟系統(tǒng)
免疫原性試驗(yàn)
◆ 免疫原性試驗(yàn)
● 免疫及炎性疾病類研究
藥物的免疫原性是指藥物和/或其代謝物誘發(fā)對(duì)自身或相關(guān)蛋白的免疫應(yīng)答或免疫相關(guān)事件的能力。免疫反應(yīng)的影響廣泛，從無(wú)臨床意義抗藥抗體的暫時(shí)出現(xiàn)，到嚴(yán)重危及生命。不必要或非預(yù)期的免疫反應(yīng)可能導(dǎo)致中和藥物的生物學(xué)活性，或與對(duì)應(yīng)的內(nèi)源性蛋白產(chǎn)生交叉免疫反應(yīng)，也可能導(dǎo)致過(guò)敏反應(yīng)和細(xì)胞因子釋放綜合征等不良事件的發(fā)生，對(duì)患者的安全和藥物的有效性均有重要影響。
藥物開(kāi)發(fā)的全生命周期中應(yīng)始終關(guān)注免疫原性研究，基于藥物作用機(jī)制，產(chǎn)品相關(guān)因素，以及擬用適應(yīng)證等因素預(yù)測(cè)免疫原性風(fēng)險(xiǎn)，基于免疫原性風(fēng)險(xiǎn)設(shè)計(jì)相應(yīng)的研究進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別。非臨床研究中免疫原性數(shù)據(jù)有助于對(duì)安全性數(shù)據(jù)的整體分析。
● 服務(wù)內(nèi)容
已成功開(kāi)發(fā)并驗(yàn)證多種分析檢測(cè)方法
流式細(xì)胞法
ELISA法
MSD法
QPCR法
可開(kāi)展各項(xiàng)免疫原性指標(biāo)檢測(cè)服務(wù)
分析方法開(kāi)發(fā)和樣品檢測(cè)：流式細(xì)胞、ELISA、MSD、QPCR
細(xì)胞免疫表型分析（小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、猴、豬）
淋巴細(xì)胞亞型檢測(cè)（CD3+、CD4+、CD8+）
B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（CD45+、CD20+）
巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù)（M1型和M2型）
NK細(xì)胞計(jì)數(shù)（CD16+、CD56+）等
多細(xì)胞因子檢測(cè)：流式細(xì)胞CBA、MSD、ELISpot
體液免疫分析：
免疫球蛋白（lgA/lgE/lgG/lgM）
補(bǔ)體(C3/C4/C5/C5a)
特異性抗體檢測(cè)及方法開(kāi)發(fā)
抗體藥物受體占有率：ELISA、流式細(xì)胞
中和抗體分析：細(xì)胞法、MSD、ELISA
抗藥性抗體ADA：ELISA、MSD
◆ 遺傳毒性試驗(yàn)
● 服務(wù)介紹
提供藥物早期發(fā)現(xiàn)所需的遺傳毒理篩選試驗(yàn)，以及臨床研究申請(qǐng)階段所需的符合GLP規(guī)范及相關(guān)指導(dǎo)原則要求的遺傳毒理標(biāo)準(zhǔn)組合試驗(yàn)。試驗(yàn)方案根據(jù)NMPA、FDA、OECD等指導(dǎo)原則設(shè)計(jì)，試驗(yàn)均可在GLP標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行。
遺傳毒理篩選試驗(yàn)
Mini Ames或Ames試驗(yàn)
體外微核試驗(yàn)
體外染色體畸變?cè)囼?yàn)
小鼠淋巴瘤試驗(yàn)
體內(nèi)微核試驗(yàn)
遺傳毒理標(biāo)準(zhǔn)組合試驗(yàn)
Ames試驗(yàn)
體外微核試驗(yàn)
體外染色體畸變?cè)囼?yàn)
小鼠淋巴瘤基因突變?cè)囼?yàn)
嚙齒類動(dòng)物體內(nèi)微核試驗(yàn)：可單獨(dú)進(jìn)行，也可包含到一般毒理試驗(yàn)中進(jìn)行
染色體畸變?cè)囼?yàn)（實(shí)驗(yàn)流程圖）
◆ 生殖毒性試驗(yàn)
● 服務(wù)介紹
生殖毒性研究是藥物進(jìn)入臨床研究及上市的重要環(huán)節(jié)。旨在揭示藥物對(duì)哺乳動(dòng)物生殖功能和胚胎及胎兒發(fā)育的影響，是藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)的重要內(nèi)容。主要目的是通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)反映受試物對(duì)哺乳動(dòng)物生殖功能和發(fā)育過(guò)程的影響，預(yù)測(cè)其可能產(chǎn)生的對(duì)生殖細(xì)胞、生育力、妊娠、分娩、哺乳等親代生殖機(jī)能的不良影響，以及對(duì)于代胚胎-胎兒發(fā)育、出生后發(fā)育的不良影響。
我們根據(jù)研發(fā)策略結(jié)合受試物的結(jié)構(gòu)，為客戶提供靈活的試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)和執(zhí)行，提供符合NMPA、FDA、OECD的GLP規(guī)范的Seg I-III試驗(yàn)。
● 服務(wù)內(nèi)容
I段生殖毒性試驗(yàn)
生育力與早期胚胎發(fā)育毒性試驗(yàn)，在交配前到交配期直至胚胎著床給藥，觀察對(duì)父體和母體一般毒性、生育力影響、早期胚胎發(fā)育毒性，評(píng)價(jià)藥物對(duì)生育力和早期胚胎發(fā)育的影響。
評(píng)價(jià)內(nèi)容：雄性精子、雌性動(dòng)情周期、交配行為、生育力、胚胎著床前階段和著床等。
II段生殖毒性試驗(yàn)
胚胎-胎仔發(fā)育毒性試驗(yàn)，又稱致畸敏感期毒性試驗(yàn)。在器官發(fā)生期給藥，觀察對(duì)母體一般毒性、胚胎胎仔發(fā)育毒性(死亡、畸形、發(fā)育異常)，旨在揭示藥物可能存在的胚胎-胎仔毒性和致畸性。
評(píng)價(jià)內(nèi)容：妊娠動(dòng)物毒性、胚胎胎仔死亡、胎仔外觀改變、內(nèi)臟和軟組織改變，骨骼數(shù)量和形態(tài)變化。
III段生殖毒性試驗(yàn)
圍產(chǎn)期生殖毒性試驗(yàn)，在圍產(chǎn)期和哺乳期給藥，觀察藥物對(duì)母體一般毒性、分娩、哺乳、子代發(fā)育毒性(死亡、畸形、發(fā)育異常)、功能性毒性。
評(píng)估內(nèi)容：評(píng)估妊娠動(dòng)物毒性、子代圍產(chǎn)期存活、子代的生長(zhǎng)和發(fā)育的改變以及功能缺陷，包括感覺(jué)功能、自發(fā)活動(dòng)、學(xué)習(xí)和記憶、性成熟、成熟時(shí)的生殖能力。
◆ 致癌性試驗(yàn)
● 服務(wù)內(nèi)容
致癌性試驗(yàn)的目的是在動(dòng)物中識(shí)別潛在致癌作用，從而評(píng)價(jià)人體中的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)。
致癌試驗(yàn)的必要性：
實(shí)驗(yàn)室研究、動(dòng)物毒理學(xué)試驗(yàn)和人體數(shù)據(jù)中出現(xiàn)的任何擔(dān)憂因素；
預(yù)期在患者一生中大部分時(shí)間連續(xù)使用的藥物；
由于致癌性試驗(yàn)耗時(shí)耗力，只有當(dāng)人體暴露情況確實(shí)需要?jiǎng)游锝K生給藥研究信息來(lái)評(píng)價(jià)其潛在致癌性時(shí)，才進(jìn)行致癌性試驗(yàn)。
檢測(cè)方法
案例分享
◆ 依賴性試驗(yàn)
● 目的
藥物依賴性是指由于藥物對(duì)軀體（生理）或精神（心理）的藥理作用而使機(jī)體產(chǎn)生反復(fù)用藥的需求，以使其感覺(jué)良好或避免感覺(jué)不適。藥物依賴性評(píng)估可用于判斷藥物依賴性程度和使用風(fēng)險(xiǎn)，指導(dǎo)說(shuō)明書(shū)撰寫(xiě)，決策藥品上市后風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)要求及管理標(biāo)準(zhǔn)（如列入麻醉藥品目錄或精神藥品目錄）等。與藥物依賴性有關(guān)聯(lián)但有所差異的另一概念為藥物濫用。藥物濫用是指對(duì)藥物有意的、非醫(yī)療目的的使用，以達(dá)到期望的生理或精神效應(yīng)。
● 服務(wù)內(nèi)容
動(dòng)物依賴性行為學(xué)試驗(yàn)：
一般行為學(xué)試驗(yàn)
獎(jiǎng)賞效應(yīng)/強(qiáng)化特性的評(píng)價(jià)（自身給藥試驗(yàn)、條件位置偏愛(ài)試驗(yàn)）
與已知濫用藥物效應(yīng)相似性的評(píng)價(jià)
軀體依賴性的評(píng)價(jià)
◆ 局部毒性試驗(yàn)
● 目的
研究藥物制劑在給藥部位使用后引起的局部和/或全身毒性，以提示臨床應(yīng)用時(shí)可能出現(xiàn)的毒性反應(yīng)、毒性靶器官、安全范圍。
溶血性實(shí)驗(yàn)
體外溶血性試驗(yàn)
體內(nèi)溶血性試驗(yàn)
過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)
主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)（ASA）
被動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)（PCA）
主動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)（ACA）
豚鼠最大化試驗(yàn)（GPMT）
豚鼠封閉斑貼試驗(yàn)（BT）
皮膚光過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)
刺激性實(shí)驗(yàn)
皮膚刺激性試驗(yàn)
血管刺激性試驗(yàn)
肌肉刺激性試驗(yàn)
粘膜刺激性試驗(yàn)
皮膚給藥光毒性試驗(yàn)
需開(kāi)展制劑安全性試驗(yàn)情況
創(chuàng)新藥：全面評(píng)估系統(tǒng)性風(fēng)險(xiǎn)+制劑安全性風(fēng)險(xiǎn)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)需支持臨床試驗(yàn)方案。
改良型藥物：處方工藝或給藥途徑變更時(shí)（如口服改注射），需重新評(píng)價(jià)制劑安全性。
仿制藥：處方工藝或給藥途徑變更時(shí)（如口服改注射），需重新評(píng)價(jià)制劑安全性。
生物制品：參考ICH S6（R1），關(guān)注免疫原性，重大變更需補(bǔ)充安全性數(shù)據(jù)。
特殊豁免品種：注射用水、氯化鈉注射液等藥學(xué)質(zhì)控簡(jiǎn)單品種，通常無(wú)需提供安全性資料。
進(jìn)口注冊(cè)產(chǎn)品：可接受境外規(guī)范的動(dòng)物試驗(yàn)或臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)。
◆ 毒代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)
毒代動(dòng)力學(xué)定義：是藥代動(dòng)力學(xué)（PK）和毒理學(xué)相結(jié)合的交叉學(xué)科，是藥代動(dòng)力學(xué)在全身暴露評(píng)價(jià)中的延伸，為非臨床毒性研究的組成部分，或?yàn)槠湟惶厥庠O(shè)計(jì)的支持性研究，以評(píng)估藥物的全身暴露情況，用于闡明毒理學(xué)發(fā)現(xiàn)及其與臨床安全性問(wèn)題的相關(guān)性。
毒代動(dòng)力學(xué)研究方法：運(yùn)用藥代動(dòng)力學(xué)的原理和方法。
毒代動(dòng)力學(xué)研究重點(diǎn)：描述動(dòng)物的全身暴露及其與毒性研究劑量、時(shí)間的關(guān)系解釋毒性試驗(yàn)結(jié)果，而不是描述受試物的基本藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)特征。
● 研究類型
單次給藥毒性試驗(yàn)伴隨毒代
重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)伴隨毒代
遺傳毒性試驗(yàn)伴隨毒代
生殖毒性試驗(yàn)伴隨毒代
致癌性試驗(yàn)伴隨毒代
伴隨生物分布研究
毒性試驗(yàn)條件下的藥代動(dòng)力學(xué)研究
藥物毒代動(dòng)力學(xué)